LA PENICILLINE AMIDASE D’ESCHERICHIA COLI: RECHERCHES DES MEILLEURES CONDITIONS DE PRODUCTION PAR BACTERIES RECOMBINEES, MISE AU POINT DE TECHNIQUES DE PRODUCTION ET DE CARACTERISATION DE MUTANTS, ETUDE DE CES MUTANTS.

Hassan N. ZOUHEIRY

Ce travail, réalisé en collaboration avec Rhône‑Poulenc Santé, a consisté d'une part, à étudier la régulation de 1'expression du gène cloné de la pénicilline amidase (PA) dans une souche mutante, d'autre part, à développer une technique de mutagénèse chimique adaptée à l’étude d'enzyme, à l’appliquer au gène PA et à caractériser les mutants obtenus.

La souche transformée présente les caractéristiques suivantes par rapport à la souche non transformée: une exigence plus importante en source de carbonne, un effet non pas négatif mais positif du glucose sur la production de PA, une expression en partie constitutive, une stimulation par l’acide phénylacétique n'est observée qu'en présence de glucose.

La majorité des mutants PA obtenus est affectée dans le processus de maturation protéolytique interne.

Un grand nombre des mutations responsables de ce phénotype est localisé dans la région C-terminale de la grande sous-unité qui doit donc jouer un rôle important dans ce processus.